1. Ознайомлення з продуктом
Назва продукту: пробіотичний порошок для перорального смаку
Характеристики: 2г*30шт/ящ
Показання: композиція штаму, що надається цим продуктом, може пригнічувати ріст ключових патогенних бактерій, які викликають неприємний запах з рота, і може ефективно полегшити симптоми неприємного запаху з рота.
Спосіб застосування: 3 рази на день по 1 таблетці; сухий порошок рекомендується приймати внутрішньо безпосередньо після їжі. Людям з хронічним неприємним запахом з рота необхідно приймати його тривалий час, поки дихання не стане свіжим.
Спосіб зберігання: зберігати в прохолодному місці, бажано в холодильнику при 4 градусах.
Кількість життєздатних: пробіотична суміш (50 млрд КУО/г), Bacillus coagulans PB-BC 02 (20 млрд КУО/г) і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 (30 млрд КУО/г).
Інші інгредієнти: 200 мг сорбітолу, 200 мг лимонної кислоти, 200 мг порошку м’яти перцевої, 200 мг вітаміну С, 100 мг фруктоолігосахариду, 200 мг галактоолігосахариду, 100 мг сукралози, 100 мг харчового ароматизатора.
2. Патогенез
Флора порожнини рота є ключовим компонентом бар’єру слизової оболонки порожнини рота та імунної відповіді, які можуть протистояти вторгненню патогенів і запобігати та лікувати захворювання порожнини рота. Мікроекологічний дисбаланс порожнини рота може знищити бар’єр слизової оболонки порожнини рота та створити умови для колонізації бактерій, що викликають неприємний запах, викликаючи таким чином захворювання ротової порожнини, такі як галітоз. Оральний галітоз (IOH) становить від 80% до 90% галітоза і в основному спричинений виробленням летких сполук сірки ротовими мікроорганізмами. Fusobacterium nucleatum може розкладати сірковмісні субстрати в ротовій порожнині на леткі сполуки сірки. Летючі сполуки сірки (VSC) та їхні метаболіти також можуть утворювати такі речовини, як скатол, кадаверин, індол і путресцин, які можуть спричиняти неприємний запах із рота.
В даний час традиційне лікування неприємного запаху з рота в основному включає механічне видалення (чистка зубів, зішкріб язика тощо), хімічну терапію (ополіскувач ротової порожнини хлоргексидином, жування гумки тощо), а також використання традиційної китайської медицини та натуральних продуктів (поліфенолів чаю). , вітамін С, катехіни тощо). і використання пробіотиків тощо. Традиційні методи лікування мають короткочасний ефект, а тривале застосування може спричинити дисбаланс ротової флори. Пробіотики можуть регулювати ротову мікрофлору від кореня та пригнічувати ріст бактерій, що викликають запах. Тому використання пробіотиків для лікування неприємного запаху з рота поступово стало гарячою точкою досліджень.
3. Механізм дії пробіотиків, що покращують неприємний запах з рота
Подібно до мікробних захворювань, таких як карієс зубів і пародонтит, неприємний запах з рота можна лікувати мікробно, впливаючи на бактерії-збудники. Пробіотики можуть пригнічувати ріст патогенних бактерій порожнини рота, регулювати флору порожнини рота та підтримувати здоров’я мікроекології порожнини рота. Основні механізми, за допомогою яких діють пробіотики, включають такі аспекти: (1) Конкурують за сайти зв’язування, зменшують колонізацію патогенних бактерій і коагрегують з патогенними бактеріями. ; (2) Конкурувати за поживні речовини та фактори росту та виробляти антибактеріальні речовини; (3) Посилення імунної відповіді господаря та пригнічення виробництва прозапальних цитокінів, індукованих патогенами.
4. Пробіотики Hehe Biotech для зменшення неприємного запаху з рота
Номер штаму Bacillus coagulans — PB-BC02, а назва — Bacillus coagulans. Він зберігається в Центрі колекції китайських типових культур Уханьського університету в Ухані, Китай. Дата депозиту – 12 грудня 2018 р. Номер депозиту – CCTCC NO: M2018889.
5. Оцінка ефекту поліпшення запаху з рота
У цьому дослідженні спочатку було перевірено 5 пробіотичних штамів шляхом оцінки здатності пробіотиків пригнічувати вироблення H2S Fusobacterium nucleatum, а потім оцінено здатність 5 пробіотичних штамів пригнічувати вироблення летких сульфідних сполук (VSC) і біоплівки Fusobacterium. ядерце. Bacillus coagulans PB-BC 02 і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 були двома штамами пробіотиків із хорошими ефектами in vitro. Нарешті, порівнювали швидкість пригнічення росту Fusobacterium nucleatum одноштамовими пробіотиками та складними пробіотиками. Результати показали, що комплексна інгібуюча дія пробіотиків на ріст Fusobacterium nucleatum є кращою, ніж у окремих бактерій, що свідчить про те, що комбінація Bacillus coagulans PB-BC 02 і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 покращує неприємний запах з рота. . Методи випробування та результати є такими:
5.1 Здатність пробіотиків пригнічувати утворення H2S Fusobacterium nucleatum
Принцип тесту: реакція H2S і FeSO4 з утворенням осаду чорного сульфіду заліза FeS використовується для оцінки здатності різних пробіотиків пригнічувати утворення H2S Fusobacterium nucleatum.
Конкретна операція: приготуйте розчин із сульфату заліза та тіосульфату натрію, відфільтруйте його через стерильну фільтрувальну мембрану {{0}}.22 мкм і додайте його до культурального середовища BHI, щоб отримати кінцеву концентрацію сульфату заліза та тіосульфату натрію 0.2‰ і тіосульфату 0,3‰. Потім додавали 2% 109 КУО/мл бактеріальної суспензії Fusobacterium nucleatum, а потім 5% пробіотичний бактеріальний розчин і культивували в анаеробних умовах при 37 градусах протягом 36 годин.
Результати випробувань: екран на основі кількості опадів. «-» означає відсутність осаду, що вказує на те, що пробіотики мають сильну інгібіторну здатність проти Fusobacterium nucleatum. «+» — мало опадів, «++» — багато опадів, а « +++» — багато осаду. Результати наведено в таблиці 1. Серед 31 пробіотичного штаму 11 штамів мали невелику преципітацію, 8 штамів мали велику преципітацію, 7 штамів мали велику кількість преципітації та 5 штамів (Lactobacillus acidophilus HH-LA26, Lactobacillus paracasei HH-LP58, Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidum HH-BL18 і Bacillus coagulans PB-BC 02) не показали преципітації, що вказує на їх потенціал для зменшення запаху з рота.
Таблиця 1 Здатність 31 пробіотичного штаму інгібувати продукування H2S Fusobacterium nucleatum
|
процідити |
номер штаму |
Кількість опадів |
процідити |
номер штаму |
Кількість опадів |
|
Lactobacillus plantarum |
HH-LP56 |
+ |
Pediococcus acidilactici |
HH-PA29 |
++ |
|
Lactobacillus plantarum |
HH-LP78 |
+ |
Педіокок пентозацеус |
HH-PP57 |
+++ |
|
Lactobacillus reuteri |
PB-LR09 |
+ |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
HH-LLL39 |
+++ |
|
Лактобактерії ацидофілін |
HH-LA26 |
- |
Lactococcus lactis subsp. креморис |
HH-LLC36 |
+++ |
|
Лактобактерії рамноз |
PB-LR76 |
+ |
Lactococcus lactis subsp. діацетил |
HH-LLD37 |
+++ |
|
Лактобактерії казеї |
PB-LC39 |
+ |
Біфідобактерії лактіс |
HH-BA68 |
++ |
|
Лактобактерії паракази |
HH-LP58 |
- |
Біфідобактерія бреве |
HH-BR26 |
+ |
|
Лактобактерії саліварі |
HH-LS17 |
- |
Біфідобактерія лонгум |
HH-BL18 |
- |
|
Lactobacillus bulgaricus |
HH-LB57 |
++ |
Біфідобактерія біфідум |
HH-BB27 |
++ |
|
Lactobacillus helveticus |
HH-LPH17 |
+ |
Біфідобактерія інфантіс |
HH-BI27 |
++ |
|
Lactobacillus johnsonii |
LBJ 456 |
+ |
Біфідобактерія підлітковий |
HH-BA07 |
+++ |
|
Лактобактерії гассері |
HH-LG07 |
+ |
Лактобактерії equi Кумулус підп. |
HH-LK08 |
+++ |
|
Лактобактерії фермент |
HH-LF392 |
+ |
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
- |
|
Лактобактерії криспати |
HH-LC323 |
++ |
Acetobacter tropicalis |
HH-AT01 |
+++ |
|
Лактобактерії сакеї |
LSS858 |
++ |
Lactobacillus plantarum |
N-1 |
+ |
|
Стрептокок термофільна палиця |
HH-ST08 |
++ |
5.2 Здатність пробіотиків пригнічувати вироблення летких сполук сірки (ВСС) Fusobacterium nucleatum
Метод випробування: спочатку було перевірено п’ять штамів пробіотиків на основі їх здатності пригнічувати продукування H2S Fusobacterium nucleatum, а VSCs, що продукуються Fusobacterium nucleatum, були додатково кількісно визначені за допомогою приладу Halimeter. Загалом 2 мл 107 КУО/мл суспензії бактерій Fusobacterium nucleatum і 15% (об’єм/об’єм) розчину пробіотиків додавали до пробірки Hungate. Після спільного культивування протягом 9 годин було виміряно здатність пробіотиків пригнічувати виробництво Fusobacterium nucleatum. можливості ВСК.
Результати тесту: VSC є головним винуватцем неприємного запаху з рота. Вони не тільки відображають ступінь неприємного запаху з рота, але і пошкоджують тканини ясен, що є дуже важливим показником. Шляхом вимірювання інгібіторної швидкості п’яти штамів, отриманих у результаті попереднього скринінгу VSCs, продукованих Fusobacterium nucleatum, штами були додатково скринінговані. Результати наведені в таблиці 2. Серед них інгібуюча здатність 3 штамів була більшою ніж 80%, а інгібуюча здатність 2 штамів була більшою ніж 80%. Нижче 70%. Таким чином, три пробіотичні штами, включаючи Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidus longum HH-BL18 і Bacillus coagulans PB-BC02, були обрані для вивчення їх впливу на формування біоплівки Fusobacterium nucleatum.
Таблиця 2. Вплив пробіотиків на виробництво VSCs Fusobacterium nucleatum
|
процідити |
номер штаму |
Швидкість гальмування |
|
Лактобактерії ацидофілін |
HH-LA26 |
66% |
|
Лактобактерії паракази |
HH-LP58 |
63% |
|
Лактобактерії саліварі |
HH-LS17 |
86% |
|
Лактобактерії біфідум лондум |
HH-BL18 |
83% |
|
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
90% |
5.3 Здатність пробіотиків пригнічувати утворення біоплівки Fusobacterium nucleatum
Метод тестування: відрегулюйте бактеріальну концентрацію Fusobacterium nucleatum до 107 КУО/мл і залиште на 9 годин. Потім додайте його в 96-лунковий планшет. Додайте 180 мкл бактеріальної суспензії Fusobacterium aggregates і 20 мкл пробіотичного бактеріального розчину в кожну лунку. 37 Культивування при градусі протягом 48 год. У групі негативного контролю замість пробіотичної рідини додавали такий самий об’єм середовища MRS, а в холостому контролі замість пробіотичної рідини додавали такий же об’єм BHI. Після інкубації промийте двічі буфером PBS, потім зафіксуйте 99% метанолом протягом 15 хвилин, видаліть супернатант і висушіть при кімнатній температурі. Після завершення висихання додайте 100 мкл 0,1% розчину кристалічного фіолетового в кожну лунку, пофарбуйте протягом 5 хвилин, промийте двічі стерильною водою після фарбування, а потім помістіть при кімнатній температурі до повного висихання. Нарешті додайте 200 мкл 33% розчину оцтової кислоти для розчинення. Після змішування піпеткою відберіть 175 мкл з кожної лунки та додайте в новий 96-планшет із лунками та прочитайте значення абсорбції при 570 нм за допомогою пристрою для зчитування мікропланшетів. Метод розрахунку зменшення, опосередкованого біоплівкою, — це швидкість інгібування (%)=(негативна контрольна біоплівка – кількість супернатантної інтервенційної біоплівки) / негативна контрольна біоплівка.
Результати тесту: Пародонтальні кишені та наліт на язиці є факторами ризику неприємного запаху з рота, оскільки вони забезпечують ідеальне середовище для росту бактерій, які виробляють VSC та інші молекули запаху. Мікроорганізми, як правило, існують у вигляді біоплівок у пародонтальних кишенях і покриві язика. Fusobacterium nucleatum служить проміжною бактерією містка в утворенні зубного нальоту. Утворення його біоплівки є ключем до виникнення неприємного запаху з рота. Тому інгібування його біоплівки є важливим кроком у полегшенні неприємного запаху з рота. Можливості надаються. Метод фарбування кристалічним фіолетовим використовувався для визначення здатності Lactobacillus пригнічувати утворення біоплівки Fusobacterium nucleatum. Результати наведено в таблиці 3. При додаванні 5% розчину пробіотичних бактерій Bacillus coagulans PB-BC 02 і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 мають найкращий ефект інгібування, що перевищує 35%. Виходячи з результатів інгібування виробництва VSC та біоплівок Fusobacterium nucleatum, Bacillus coagulans PB-BC 02 та Lactobacillus salivarius HH-LS 17 мають кращі ефекти in vitro. Далі оцінюється їх вплив на ріст Fusobacterium nucleatum.
Таблиця 3 Інгібуюча дія пробіотиків на біоплівку Fusobacterium nucleatum
|
процідити |
номер штаму |
Швидкість гальмування |
|
Лактобактерії ацидофілін |
HH-LA26 |
27.34% |
|
Лактобактерії паракази |
HH-LP58 |
25.72% |
|
Лактобактерії саліварі |
HH-LS17 |
39.77% |
|
Лактобактерії біфідум лондум |
HH-BL18 |
33.86% |
|
Bacillus coagulans |
PB-BC02 |
38.65% |
5.4 Вплив пробіотиків на ріст Fusobacterium nucleatum
Метод тестування: додайте 190 мкл 107 КУО/мл бактеріальної суспензії Fusobacterium nucleatum до кожної лунки планшета з 96-лунками, потім додайте 10 мкл розчину пробіотичних бактерій, культивуйте в анаеробних умовах при 37 градусах і контролюйте при 600 нм кожні 3 години. Виміряйте значення абсорбції та намалюйте криву зростання.
Результати тесту: Багато захворювань ротової порожнини викликані дисбалансом ротової флори. Певна антибактеріальна здатність допомагає пробіотикам регулювати флору порожнини рота. Результати наведено на малюнку 1. Інгібуюча дія пробіотиків на Fusobacterium nucleatum відбувається в такому порядку: складні пробіотики > Lactobacillus salivarius HH-LS 17 > Bacillus coagulans PB-BC 02 > MRS середня контрольна група, що вказує на те, що обидва штами пробіотиків є Він може пригнічувати ріст Fusobacterium nucleatum, а поєднання двох штамів має кращий інгібуючий ефект щодо Fusobacterium nucleatum.

Рисунок 1 Вплив пробіотиків на ріст Fusobacterium nucleatum
Таким чином, Bacillus coagulans PB-BC 02 і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 можуть пригнічувати виробництво H2S, VSC і біоплівки Fusobacterium nucleatum, і здатність пригнічувати ріст Fusobacterium nucleatum після змішування є сильнішою, ніж у окремих штамів, вказуючи на те, що комбінація Bacillus coagulans PB-BC 02 і Lactobacillus salivarius HH-LS 17 може зменшити неприємний запах з рота.
посилання:
[1] Karbalaei M, Keikha M, Kobyliak NM, Khatib Zadeh Z, Yousefi B, Eslami M. Полегшення неприємного запаху з рота за допомогою пробіотиків та їх захисних механізмів у ротовій порожнині. Нові мікроби Нове зараження. 23 квітня 2021; 42:100887. doi: 10.1016/j.nmni.2021.100887. PMID: 34123388; PMCID: PMC8173312.
[2] Penala S, Kalakonda B, Pathakota KR, Jayakumar A, Koppolu P, Lakshmi BV, Pandey R, Mishra A. Efficacy of local use of probiotics as adjunct to scaling and root planning in chronic periodontiti and halitosis: randomized controlled суд. J Res Pharm Pract. 2016 квіт.-черв.;5(2):86-93. doi: 10.4103/2279-042X.179568. PMID: 27162801; PMCID: PMC4843589.
[3] Цзян Чжентао. Скринінг лактобацил, які інгібують Fusobacterium nucleatum, і оцінка їх ефективності в зменшенні неприємного запаху з рота [D]. Університет Цзяньнань, 2022. DOI: 10.27169/d.cnki.gwqgu.2022.000533.
[4] Хуан Чжицян, Чен Юнбо. Побудова та оцінка моделі неприємного запаху з рота у щурів, викликаного дисбалансом ротової флори [J]. Дослідження оральної медицини, 2023, 39(08): 745-750. DOI: 10.13701/j. cnki.kqyxyj.2023.08.015.
[5] Ян Веньцзе, Є Вей. Дослідження in vitro антибактеріальної дії двох видів пробіотиків на бактерії, що викликають неприємний запах з рота [J]. Оральна медицина, 2015, 35(03):179-182.DOI:10.13591/j.cnki.kqyx .2015.03.005.
Популярні Мітки: пробіотики для зняття неприємного запаху з рота, виробники, фабрика, на замовлення, оптом, оптом












